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本文概述了细胞周期与癌症生物学研究中的科学与技术挑战。我们将介绍牛津仪器Andor台式共聚焦显微镜 BC43,并展示BC43如何攻克细胞周期与癌症生物学研究领域的难题。
视频1——基于Andor桌面式转盘共聚焦BC43 实时观察细胞分裂(有丝分裂)。利用BC43的共聚焦成像模式对哺乳动物细胞进行了长达4小时的成像。在每个时间点,研究人员对四个独立位置进行了成像,每个位置分别获取了3个通道和15层Z轴的信息。视频展示了其中的一个位置。通过观察微管(黄色)和DNA(青色),可以在整个实验过程中观察细胞进入和退出有丝分裂的过程。(青色:DNA,黄色:微管,红色:Sir肌动蛋白)。图片版权:Ines Baião(Santos)、Álvaro Tavares(Universidade do Algarve),Claudia Florindo(Oxford Instruments - Andor)。
BC43是Andor推出的一款全新的即插即用型高速共聚焦系统。BC43是一款桌面式共聚焦成像仪,具备卓越的成像性能。该系统提供了三种成像模式,用户可以根据实验目标选择不同的成像模式,且支持同时使用:
图1——基于Andor桌面式共聚焦显微镜(BC43)可视化哺乳动物细胞的有丝分裂过程。 使用宽场成像模式对固定的哺乳动物细胞进行成像。A)中期细胞;B)后期细胞。图中展示了实验中获取的20个独立位置中的2个位置的图像。每个位置都采集了两个独立的通道及15 mm的厚度范围,并在成像步骤中启用了去卷积选项。在Imaris软件中对图像进行进一步处理并用最大强度投影(MIP)进行展示。(青色:微管;红色:DNA)。图片来源:Ines Baião-Santos、Álvaro Tavares(阿尔加夫大学),Claudia Florindo(Oxford Instruments - Andor)。
BC43是细胞和癌症生物学研究等多种生命科学应用的理想系统。其高速的采集速度大幅缩短了成像和处理时间,在不降低图像质量的前提下显著提升了科研生产力。
牛津仪器Andor桌面式转盘共聚焦(BC43)能够清晰成像数百微米深处的组织内3D细胞和微环境。此外,它对活细胞和组织的温和成像可持续数小时甚至数天,能够清晰可视化组织内的细胞分裂(以及细胞过度增殖)。
重要的是,所有这些成像功能都被集成在易于使用的硬件和软件中,并配备了简单的采集工作流程。
“这是一台出色的显微镜,它提供了卓越的图像质量和惊人的快速学习曲线。我发现,即使是在实验室中进行短期项目的年轻学生几乎也能立即获得结果,这是我以前在任何共聚焦系统中从未见过的。”
阿尔加维大学细胞周期和癌症生物学实验室组长阿尔瓦罗·塔瓦雷斯教授表示。
下表总结了细胞周期和癌症生物学领域的主要成像挑战,以及BC43为克服这些挑战提供的解决方案。
挑战 | 解决方案 |
长时程成像:在无光毒性或光漂白的情况下进行高质量长时程成像 | 双微透镜多针孔系统配备高效的激发滤光片和探测器,可实现灵敏成像,从而最大程度地降低光毒性和光漂白。 活细胞和组织的成像可以持续超过24小时。 提供薄且高度敏感的样品的宽场成像选项。 |
快速成像:实现快速动态事件的实时成像 | 共聚焦或宽场成像模式下的快速成像速度高达每秒44帧(fps)。 10毫秒曝光时间(确保信号可被检测)即可实现快速成像速度。 |
厚组织制备:深入厚组织进行成像 | 优化的针孔间距和尺寸可实现高背景抑制,为数百微米范围内的图像提供高信噪比。 |
大组织成像:大型样本快速成像 | 大视场(18.4mm)提高生产力(获取整个样本所需的图像更少,10X物镜下的视场为1.84毫米) 集成的电动载物台和拼接功能。通过在采集流程中勾选拼接选项,可高效采集并自动拼接整个样本 |
多样本分析(高效的生产力):多位置与拼接相结合。高速的共聚焦和宽场成像。内置拼接和反卷积 | 多位置成像-拼接选项允许在单次实验中采集样本的多个区域——提高生产力。 多点共聚焦的成像速度可达每秒44帧,比普通点扫共聚焦快10倍。 提高固定和活体成像实验的生产力。 采集流程中可一键激活的反卷积可提高采集图像的信噪比和分辨率。 采集流程中可一键激活的拼接功能可在采集后立即提供完整的图像结果。 拼接和反卷积都可以在采集流程中激活。 采集完成后可快速获得原始图像以及处理后的图像。 |
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